Hei ada! Sebagai pembekalStesen kerja manual ELISA, Saya telah melihat secara langsung betapa mengecewakannya untuk menangani kebolehubahan intra - ujian dalam ujian ELISA pada stesen kerja manual. Tetapi jangan risau, saya di sini untuk berkongsi beberapa petua dan cara untuk membantu anda mengurangkan kebolehubahan dan mendapatkan hasil yang lebih dipercayai.
Memahami intra - variabiliti assay
Mula -mula, mari kita bincangkan tentang kebolehubahan intra - ujian. Ia pada dasarnya adalah perbezaan hasil yang anda dapat apabila anda menjalankan sampel yang sama beberapa kali dalam satu ujian. Ini boleh menjadi kesakitan sebenar di leher, kerana ia menjadikan sukar untuk mempercayai data anda. Terdapat banyak faktor yang boleh menyebabkan kebolehubahan ini, seperti kesilapan pipet, masa inkubasi yang tidak konsisten, dan turun naik suhu.
Kesilapan pipet
Pipetting adalah salah satu langkah paling kritikal dalam ujian ELISA, dan ia juga merupakan salah satu sumber kebolehubahan terbesar. Malah kesilapan kecil dalam jumlah sampel atau reagen anda pipet boleh memberi impak besar kepada hasil anda. Untuk mengurangkan kesilapan pipet, pastikan anda menggunakan pipet berkualiti tinggi yang ditentukur dengan betul. Juga, luangkan masa anda semasa pipet. Jangan tergesa -gesa melalui proses, dan pastikan anda mengikuti teknik yang betul. Sebagai contoh, tahan pipet secara menegak dan tarik hujung ke kedalaman yang betul.
Satu lagi perkara yang boleh anda lakukan ialah mengamalkan kemahiran pipet anda. Kebanyakan pengeluar pipet menawarkan bahan latihan atau tangan - pada sesi latihan. Mengambil kesempatan daripada sumber -sumber ini benar -benar dapat membantu anda meningkatkan teknik anda dan mengurangkan kesilapan.
Masa inkubasi yang tidak konsisten
Inkubasi adalah satu lagi langkah di mana kebolehubahan boleh merayap. Jika sampel diinkubasi untuk jangka masa yang berlainan, ia boleh membawa kepada perbezaan dalam pengikatan antibodi dan antigen. Untuk memastikan masa inkubasi yang konsisten, gunakan pemasa dan tetapkan peringatan yang jelas. Pastikan semua telaga di dalam pinggan anda diinkubasi untuk jumlah masa yang sama.
Ia juga merupakan idea yang baik untuk menggunakan inkubator terisolasi yang baik. Perubahan suhu semasa inkubasi boleh menjejaskan kinetik tindak balas, jadi menjaga suhu stabil adalah penting. Semak suhu inkubator anda dengan kerap untuk memastikan ia berada dalam julat yang disyorkan.
Turun naik suhu
Suhu memainkan peranan besar dalam ujian ELISA. Jika suhu terlalu tinggi atau terlalu rendah, ia boleh menjejaskan pengikatan antibodi dan antigen, serta aktiviti enzim. Untuk meminimumkan turun naik suhu, simpan reagen dan sampel anda pada suhu yang disyorkan sebelum memulakan ujian. Sekiranya anda bekerja di bilik sejuk, biarkan reagen memanaskan suhu bilik perlahan -lahan dan perlahan -lahan campurkan sebelum digunakan.
Juga, cuba bekerja dalam persekitaran yang terkawal suhu. Elakkan meletakkan stesen kerja anda berhampiran tingkap, lubang udara, atau sumber perubahan suhu yang lain. Sekiranya boleh, gunakan kabinet terkawal suhu atau inkubator dengan sistem pemantauan suhu yang dibina.
Menyeragamkan protokol anda
Salah satu cara terbaik untuk mengurangkan variasi intra - ujian adalah untuk menyeragamkan protokol anda. Ini bermakna mengikuti langkah yang sama dalam urutan yang sama setiap kali anda menjalankan ujian ELISA. Berikut adalah beberapa perkara yang perlu dipertimbangkan semasa menyeragamkan protokol anda:
Penyediaan reagen
Pastikan anda menyediakan reagen anda dengan betul. Ikuti arahan pengeluar dengan teliti, dan gunakan jumlah dan kepekatan yang betul. Labelkan reagen anda dengan jelas, dan simpannya pada suhu yang disyorkan. Apabila menyediakan reagen, gunakan air tawar dan bahan kimia berkualiti tinggi.
Mencuci pinggan
Mencuci plat adalah langkah penting dalam mengeluarkan bahan yang tidak terkawal dari telaga. Mencuci tidak konsisten boleh membawa kepada kebolehubahan dalam hasil anda. Gunakan mesin basuh plat jika boleh, dan pastikan ia ditetapkan pada parameter yang betul. Jika anda mencuci plat secara manual, gunakan teknik yang konsisten. Sebagai contoh, isi setiap telaga ke tahap yang sama dan aspirasi cecair dengan cara yang sama.
Pengendalian sampel
Mengendalikan sampel anda dengan teliti untuk mengelakkan pencemaran dan kemerosotan. Gunakan tiub bersih dan petua pipet, dan simpan sampel anda pada suhu yang disyorkan. Jika anda mencairkan sampel anda, pastikan anda menggunakan faktor pencairan yang betul dan mencampurkan sampel dengan teliti.
Menggunakan contoh kawalan kualiti
Sampel kawalan kualiti adalah sampel dengan nilai yang diketahui yang anda jalankan bersama sampel ujian anda. Mereka membantu anda memantau prestasi ujian anda dan mengesan sebarang isu yang mungkin menyebabkan kebolehubahan. Pastikan anda menggunakan sampel kawalan kualiti yang tinggi, dan jalankannya dalam pelbagai replika.
Menganalisis hasil sampel kawalan kualiti anda dengan kerap. Sekiranya anda melihat sebarang penyimpangan penting dari nilai yang dijangkakan, ia boleh menjadi tanda bahawa terdapat masalah dengan ujian anda. Menyiasat isu dan mengambil tindakan pembetulan, seperti mengulang semula pipet anda atau menyesuaikan masa inkubasi anda.
Peranan stesen kerja anda
Sebagai pembekalStesen kerja manual ELISA, Saya dapat memberitahu anda bahawa mempunyai stesen kerja yang baik adalah penting untuk mengurangkan kebolehubahan intra - assay. Stesen kerja kami direka untuk menyediakan persekitaran yang stabil dan konsisten untuk ujian ELISA anda. Mereka diperbuat daripada bahan berkualiti tinggi yang tahan terhadap bahan kimia dan perubahan suhu.
Permukaan kerja adalah rata dan tahap, yang membantu memastikan pipet yang tepat. Kami juga menawarkan aksesori pilihan, seperti blok terkawal suhu dan penggoncang plat, yang dapat meningkatkan lagi prestasi ujian anda. Jika anda masih menggunakan stesen kerja lama atau tidak boleh dipercayai, mungkin masa untuk mempertimbangkan untuk menaik taraf.
Stesen kerja yang berkaitan
Sekiranya anda terlibat dalam jenis ujian lain, seperti PCR atau Analisis Sel, kami juga menawarkanStesen kerja manual PCR atau qPCRdanStesen kerja manual analisis sel. Workstation ini direka dengan perhatian yang sama terhadap perincian dan kualiti sebagai stesen kerja ELISA kami, dan mereka dapat membantu anda mengurangkan kebolehubahan dalam ujian tersebut juga.
Membungkus
Mengurangkan variasi intra - ujian dalam ujian ELISA pada stesen kerja manual memerlukan masa dan usaha, tetapi ia pasti berbaloi. Dengan mengikuti petua yang saya kongsi, seperti mengurangkan kesilapan pipet, menyeragamkan protokol anda, menggunakan sampel kawalan kualiti, dan mempunyai stesen kerja yang baik, anda boleh mendapatkan hasil yang lebih dipercayai dan konsisten.
Sekiranya anda berminat untuk mempelajari lebih lanjut mengenai kamiStesen kerja manual ELISAAtau mana -mana produk kami yang lain, kami ingin mendengar daripada anda. Hubungi kami untuk memulakan perbualan mengenai keperluan anda dan bagaimana kami dapat membantu anda meningkatkan prestasi ujian anda.
Rujukan
- Bishop, ML, Fody, Ep, & Schoeff, Le (2018). Kimia Klinikal: Teknik, Prinsip, Korelasi. Wolters Kluwer.
- Wild, D. (Ed.). (2013). Buku Panduan Immunoassay. Elsevier.
- Bahan Latihan Pengilang Pipet.